北京时分2023年12月21日乐鱼色碟，好意思国埃默里大学梁波团队在《Nature》上发表著作“Structures of the promoter-bound respiratory syncytial virus polymerase”。
该询查通过冷冻电镜单颗粒时间初度融会了启动子调解的呼吸说念合胞病毒RNA团员酶的高分辨率结构，在东说念主类历史上初度揭示了呼吸说念合胞病毒团员酶的RNA合成肇端机制。了解RNA的合成肇端进程中RSV团员酶与其RNA启动子之间的互相作用，关于相识RSV中RNA的合成机制以及建造针对RSV的抗病毒药物和调整武艺至关紧要。
美高梅 米高梅呼吸说念合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus，简称RSV）是一种高度传染性的东说念主类病原体。婴幼儿、老年东说念主、免疫系统受损的个体以及心肺疾病患者齐是RSV感染的高危东说念主群。RSV属于肺病毒科（Pneumoviridae）单负链病毒目（Mononegavirales），其基因组为单链负义RNA。RSV的RNA转录和复制由RSV的RNA依赖性RNA团员酶（RNA-dependent RNA Polymerase，简称RdRP）转录和复制。RdRP由多功能团员酶卵白（Large，简称L）和辅因子磷卵白（Phosphoprotein，简称P）构成。RSV团员酶中L卵白由五个结构域构成：RNA依赖性RNA 团员酶结构域（RdRp）、加帽结构域（Cap）、指点结构域（CD）、甲基飘零酶结构域（MT）和C结尾结构域（CTD）。而RSV团员酶中P卵白不错分为N端结构域（PNTD）、寡聚化结构域（POD）和C端结构域（PCTD）（见图1a）。
RSV中RNA的合因素为肇端、蔓延和绝交三个阶段。在RSV的RNA合成肇端进程中，RSV团员酶识别病毒RNA基因组和反基因组3'端的启动子序列，即Leader（Le）和Trailer Complementary（TrC）。之前的询查标明，RSV团员酶一个专有的特征是不错在启动子的两个不同的位置启动RNA合成：RNA的复制从启动子的第1位核苷酸开动合成；RNA的转录从Le启动子的第3位核苷酸开动合成。体外酶活本质标明，RSV团员酶在短Le和TrC模板上不错折柳在第1位和第3位核苷酸肇端RNA合成。由于阑珊RNA启动子调解的RSV团员酶的原子分辨率结构，两个不同肇端位置的结构基础仍不清爽。
作家通过体外酶活本质领受了10个核苷酸长度的Le和TrC启动子序列（简称Le10和TrC10），融会了RSV团员酶（L-P复合物）折柳与来自病毒RNA基因组和反基因组3'端启动子Le10和TrC10的高分辨率冷冻电镜结构。RNA启动子调解的团员酶结构中，卵白结构与apo-form的RSV团员酶结构十分同样，其中RdRp和Cap结构域酿成一个碗状结构，而RNA合成的活性口袋位于碗状结构的中间位置（见图1b）。Cap结构域中的priming loop照旧远隔RdRp结构域中的活性位点，示意该结构为pre-initiation的情景。不同的是，RSV团员酶L卵白RdRp结构域中的supporting helix在莫得RNA调解时是柔性的并不成被3D重构，而在两个启动子调解的团员酶电镜结构中，supporting helix不错被清爽的重构，标明RNA启动子的调会通导致RSV团员酶的结构的构象变化，使supporting helix的结构更踏实。
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图1：RSV团员酶的结构示意图和两种pre-initiation情景结构的比拟
乐鱼轮盘皇冠现金结构分析知道启动子Le10与RSV团员酶的复合物中，在团员酶的活性口袋中有4个核苷酸残基，第5-10位核苷酸残基位于模板参加通说念（template entrance channel）中，催化位点氨基酸D811正对着第3位和第4位核苷酸残基，示意该结构为启动子第3位核苷酸肇端RNA合成的pre-initiation情景；而在启动子TrC10与RSV团员酶的复合物中，在团员酶的活性口袋中只好2个核苷酸残基，第3-8位核苷酸残基位于模板参加通说念中，催化位点氨基酸D811正对着第1位和第2位核苷酸残基，示意该结构为启动子第1位核苷酸肇端RNA合成的pre-initiation情景（图2）。两个结构中乐鱼色碟，+1催化位点对应的模板RNA上的核苷酸残基均为鸟苷酸（G）。G的碱基与团员酶L卵白的氨基酸残基K619，F629以及E778之间有互相作用。其中，G碱基上的氧（O6）与氨基酸残基K619侧链上的氮（NZ）有氢键互相作用，而G碱基上的氮（N2）与氨基酸残基E778侧链上的氧（OE1）有氢键互相作用。这个发现评释了为什么RSV团员酶在肇端RNA合成时，+1催化位点对应的模板RNA核苷酸需要为G。G碱基还与氨基酸残基F629之间有π-π互相作用。这些关键氨基酸残基在单负链病毒筹算病毒RNA团员酶齐特别保守（见图1c）。
图2：RSV团员酶R（L-P复合物）折柳与来自病毒RNA基因组和反基因组3'端启动子Le10和TrC10复合物的结构示意图
此外，作家还发咫尺两个启动子调解结构中，RNA结构在+2和+5催化位点处会翻转约180°，对应与Le10序列中的第5位和第8位以及TrC10序列中的第3位和第6位，之后在+6和+7催化位点处会继续翻转约90°。之前的询查着力知道启动子序列的第3，5，8位核苷酸残基突变后，RNA团员酶对该模板的活性会昭着裁汰；同期Le10的5-10位以及TrC10的3-8位核苷酸残基均为嘧啶（U鄙俚C）且处于模板参加通说念中，当这些核苷酸的碱基突变为嘌呤碱基时，RNA团员酶对该模板的活性昭着小于其突变为嘧啶碱基。调解结构分析，作家揣摸在RSV团员酶识别RNA启动子时，倾向于调解模板参加通说念中为较小的嘧啶碱基（U鄙俚C）的启动子序列，终点是翻转180°的启动子第3，5，8位核苷酸残基（见图2b和2d）。
图3：不同单负链病毒筹算病毒RNA团员酶的结构比拟
在与其他单负链病毒筹算病毒RNA团员酶的结构（包括HMPV、VSV、RABV、PIV5、EBOV 和NDV）进行比拟时发现，它们的举座结构十分同样，主要区别在于supporting helix和priming loop的构象。举例，在EBOV团员酶中，RdRp结构域中的supporting helix距离活性中心更远。在VSV和RABV的L卵白结构中，Cap结构域中的priming loop插入催化活性口袋，并围聚RdRp结构域的催化活性氨基酸残基D811，而在RSV、HMPV、EBOV、NDV和PIV5的L卵白结构中，该priming loop远隔催化活性氨基酸残基D811，而缩回Cap结构域中，这种各异标明它们处于RNA合成的不同阶段。意思意思的时，在PIV5和NDV的L卵白结构中，包含Cap结构域催化活性氨基酸残基的intrusion loop会围聚RdRp结构域的活性中心，而不是priming loop。为了更好地相识RSV团员酶RNA合成肇端的机制，作家在RNA模板和RdRp结构域活性氨基酸D811中间的-1和+1催化位点处模拟了RNA居品的前两个核苷酸残基并与VSV和RABV团员酶中的priming loop进行结构比对，发现priming loop上揣摸的priming氨基酸W的侧链吲哚基团与催化位点-1处RNA居品的第1个核苷酸的碱基平行，可能酿成π-π互相作用（见图3）。
总而言之，该询查初度融会了RNA团员酶与启动子RNA的复合物结构，进展了RSV中两种RNA合成肇端的分子机制，为RSV的抗病毒药物研发提供了新的靶点和结构支援，同期也为其他单负链病毒筹算病毒RNA团员酶的RNA合成机制询查奠定了表面基础。
据悉，最近一场热门的足球比赛中，利物浦队的中场球员萨拉赫突然因为个人原因退赛，引起了球迷们的猜测。有人猜测他是因为家庭原因而不得不提前离开比赛，也有人猜测他与球队之间出现了矛盾。著作通信作家为梁波博士，本科毕业于中国科学时间大学，从好意思国佛罗里达州立大学赢得博士学位，之后在哈佛医学院进行博士后询查，现为埃默里大学副教会。
皇冠导航网著作第一作家曹冬冬博士，埃默里大学梁波团队助理科学家，本科毕业于中国科学时间大学，并于中国科学时间大学赢得博士学位。
梁波本质室询查意思包括通过冷冻电镜和晶体学的玄虚武艺询查生物大分子的结构和机制，单负链RNA病毒的RNA合成机制和神经生物学疾病有关卵白质的折叠机理。团队咫尺正在招聘博士后，见谅感意思的学生联系。
开头：生命科学前沿
财联社7月31日电，国务院办公厅转发国家发展改革委关于恢复和扩大消费措施的通知。其中提出，丰富文旅消费。全面落实带薪休假制度，鼓励错峰休假、弹性作息，促进假日消费。加强区域旅游品牌和服务整合，积极举办文化和旅游消费促进活动。健全旅游基础设施，强化智慧景区建设，提高旅游服务质量。鼓励各地制定实施景区门票减免、淡季免费开放等政策。在保障游客自主选择权的基础上，支持不同区域景区合作推行联票模式，鼓励景区结合实际实施一票多次多日使用制，更好满足游客多样化需求。推动夜间文旅消费规范创新发展，引导博物馆、文化馆、游乐园等延长开放时间，支持有条件的地区建设“24小时生活圈”。打造沉浸式演艺新空间，建设新型文旅消费集聚区。
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剪辑：木木